Нейтральные муконротеиды

Нами для определения углеводных соединений применялась PAS-реакция. При выявлении PAS-реакцией нейтральных мукопротеидов использовались следующие контроли: ацетилирование, ацетилирование и омыление, блокада альдегидных групп, экстрагирование липидов, растворение кислых гликозаминогликанов, сульфатирование с последующей окраской толуидиновым синим. Гликоген обнаруживался с помощью этой же реакции, а в качестве контроля применялась параллельная обработка ткани сеамилазой или диастазой. В комплексе методик для выявления мукополисахаридов мы использовали окрашивание тиазиновыми красителями: толуидиновым синим и азуром-2. Метахроматическая окраска структур на гистологических препаратах рассматривалась как свидетельство содержания в этих структурах соединений с активными (в данных условиях постановки реакции) кислотными группами. Отсутствие метахромазии не означало, что кислые гликозаминогликаны не содержатся в неокрашенных структурах: их реакционные группы могли быть блокированы (белками, пептидами, кальцием); они могли присутствовать в виде частичного деполимеризованных соединений, вымываемых из препаратов в процессе их приготовления и окраски; наконец, их концентрация могла быть слишком низкой и не выявляться гистохимическими методами. Методом Хейла на гистохимических препаратах окрашивались лишь структуры, содержащие такие полимерные полианионы, как кислые гликозаминогликаны. Им легко окрашивались вещества, имеющие только СООН-группы, причем метод Хейла давал более интенсивную окраску этих соединений, чем альциаповый синий. Для окраски эпителиальных муцинов в некоторых случаях употреблялся альциановый синий. При рН раствора красителя 0,5-2,8 положительная реакция обусловливалась главным образом кислыми гликозаминогликанами и сиаломуко-протеидами.

Комментарии запрещены.